Viirushepatiit B. Haiguse vormi ja staadiumi määramine

Kinnitatud viirushepatiidi B (HBV) põhjalik uuring. Nakkuse markerite analüüs võimaldab teil kindlaks teha haiguse kliinilise staadiumi, subjekti immunoloogilise seisundi, samuti hinnata ravi efektiivsust. See hõlmab viirusevalkude (antigeenide) määramist, spetsiifiliste antikehade põhiklasse, samuti viiruse DNA tuvastamist veres.

Millist biomaterjali saab uurimiseks kasutada?

Kuidas uuringuks valmistuda??

  • 24 tunni jooksul enne uuringut välistage dieedist rasvased toidud.
  • Ärge suitsetage 30 minutit enne testi..

Uuringu ülevaade

B-viirushepatiit (HBV) on nakkushaigus, mis põhjustab tõsiseid maksakahjustusi. Sageli muutub B-hepatiit krooniliseks, selle kulg pikale venib ning kutsub esile tsirroosi ja maksavähi alguse.

B-hepatiidi viirus (Hepadnaviridae) sisaldab kaheahelalist DNA-d, mida ümbritseb HBcAg antigeeni sisaldav 27 nm nukleokapsiid ja HBsAg antigeeni sisaldav väliskest. See antigeen leitakse veres 6 nädalat enne haiguse sümptomite ilmnemist ja seda saab pikka aega tuvastada nii nende juuresolekul kui ka nende puudumisel (kroonilise hepatiidi ja kandmise korral). Haiguse varases staadiumis esineb 90-95% patsientidest.

B-hepatiidi viiruse tunnusjoon on see, et see siseneb otse vereringesse ja ringleb selles kogu haiguse vältel. Mõnel patsiendil püsib viirus veres terve elu. Sel põhjusel võivad nakkuse allikaks olla mitte ainult need, kellel on hepatiit ägedas vormis, vaid ka need, kellel on see haigus juba olnud, samuti inimesed, kellel seda haigust ei esine, kuid nad on viiruse kandjad.

Täielik taastumine registreeritakse 92–95% -l ägeda B-hepatiidiga patsientidest ja ainult 5-8% -l neist on üleminek haiguse kroonilisse vormi.

B-hepatiiti ravitakse eranditult haiglas. See haigus pikema ravikuuri korral on primaarse hepatotsellulaarse kartsinoomi (maksavähk) riskitegur..

B-hepatiidi viiruse elus eristatakse kahte faasi: replikatsiooni ja integratsiooni faas. Replikatsiooni faasis viirus taastub (paljuneb). Viiruse DNA siseneb hepatotsüütide tuumasse, kus DNA polümeraasi kasutatakse nukleokapsiidi sünteesimiseks, mis sisaldab viiruse DNA, HBcAg, HBeAg antigeene, mis on immuunsussüsteemi peamine sihtmärk. Seejärel migreerub nukleokapsiid tuumast tsütoplasmasse, kus väliskesta ümbrisvalgud (HBsAg) replitseeruvad ja seega komplekteeritakse täielik virioon. Sel juhul siseneb vereringesse rakkudevahelise ruumi kaudu liigne HBsAg sisaldus, mida ei kasutatud viiruse kokkupanemiseks. Viiruse täielik kokkupanek (replikatsioon) lõpeb selle lahustuva nukleokapsiidi antigeeni - HBeAg esitamisega hepatotsüütide membraanil, kus immunotsüüdid seda ära tunnevad. HBcAg antigeeni ei määrata seroloogiliste meetoditega, kuna see puudub veres vabas vormis. Selle antigeeni vastaste antikehade (anti-HBc) olemasolu veres, mis on toodetud selle kõrge immunogeensuse tõttu.

B-hepatiidi viiruse replikatsiooni faasi markerid on:

  • vere antigeenide HBeAg ja anti-HBc (Ig M) tuvastamine.

7–12% -l kroonilise B-viirushepatiidiga patsientidest on võimalik replikatsioonifaasi spontaanne üleminek mittereplikatiivsesse faasi (sel juhul kaob HBeAg verest ja ilmub anti-HBe). See on replikatsiooni faas, mis määrab maksakahjustuse raskuse ja patsiendi nakkavuse.

Integreerimisfaasis integreeritakse (manustatakse) HBsAg geeni kandev B-hepatiidi viiruse fragment hepatotsüütide genoomi (DNA) koos järgneva peamiselt HBsAg moodustumisega. Samal ajal lakkab viiruse replikatsioon, kuid hepatotsüütide geneetiline aparaat sünteesib jätkuvalt suures koguses HBsAg.

Viiruse DNA-d saab integreerida mitte ainult hepatotsüütidesse, vaid ka pankrease, süljenäärmete, leukotsüütide, spermatosoidide, neerurakkude rakkudesse.

Integratsioonifaasiga kaasneb kliinilise ja morfoloogilise remissiooni teke. Selles faasis moodustub enamikul juhtudel viiruse suhtes immunoloogiline tolerantsuse tase, mis põhjustab protsessi aktiivsuse ja HBsAg kandmise peatamise. Integratsioon muudab viiruse immuunkontrolli jaoks kättesaamatuks.

Integratsioonifaasi seroloogilised markerid:

  • ainult HBsAg sisaldus veres või kombinatsioonis anti-HBc (IgG);
  • DNA viiruse puudumine veres;
  • HBeAg serokonversioon anti-HBe-ks (st HBeAg kadumine verest ja anti-HBe ilmumine).

Infektsiooni põdevad patsiendid, kellel on viiruse antikehad, ei saa B-hepatiiti uuesti nakatada. Mõnel juhul täielikku taastumist ei toimu ja inimene muutub kroonilise viiruse kandjaks. Viirusekandja võib olla asümptomaatiline, kuid mõnel juhul areneb krooniline aktiivne hepatiit B. Aktiivse viirusekandja peamine riskitegur on vanus, millal inimene nakatus: imikute puhul ületab riskitase 50%, täiskasvanute puhul jääb see 5-10% tasemele.. Uuringud näitavad, et mehed muutuvad kandjateks suurema tõenäosusega kui naised.

HBsAg - B-hepatiidi viiruse pinnaantigeen

B-hepatiidi viiruse pinnaantigeen (HBsAg) on ​​viiruse pinnal esinev valk. Seda leidub veres ägeda ja kroonilise B-hepatiidiga. Varasem marker. Maksimaalselt jõuab see haiguse 4.-6. Nädalaks. Ägeda hepatiidiga kestab see kuni 6 kuud, üle 6 kuu - haiguse üleminekuga kroonilisse vormi.

HBeAg - B-hepatiidi viiruse tuuma E

Antigeen viiruse tuumas. Ilmub veres samaaegselt HBsAg-ga ja püsib 3–6 nädalat. HBeAg ilmneb ägeda B-hepatiidiga patsiendi verre samaaegselt HBsAg-ga või pärast seda ja püsib veres 3–6 nädalat. Viitab aktiivsele paljunemisele ja kõrgele viiruse leviku riskile nii seksuaalse kontakti ajal kui ka perinataalselt. HBeAg-positiivse seerumi nakkavus on 3-5 korda kõrgem kui HBsAg-positiivsel. HBeAg tuvastamine veres enam kui 8-10 nädala jooksul näitab haiguse üleminekut krooniliseks vormiks. Viiruse replikatiivse aktiivsuse puudumisel kroonilise infektsiooni ajal HBeAg ei tuvastata. Selle välimus näitab ka viiruse taasaktiveerumist, mis sagedamini toimub immunosupressiooni taustal.

B-viirushepatiidi ravis näitavad HBeAg kadumine ja HBe antigeeni antikehade ilmnemine ravi efektiivsust.

anti-HBc (Ig M) - spetsiifilised IgM klassi antikehad viiruse tuuma tuuma antigeeni suhtes

Tootmise alustamine juba enne kliinilisi ilminguid viitab aktiivsele viiruse replikatsioonile.

Ilmuvad veres 3-5 nädala pärast, püsivad 2–5 kuud ja kaovad taastumisperioodil.

anti-HBc - B-hepatiidi viiruse tuumaantigeeni vastased antikehad (IgM + IgG)

Oluline diagnostiline marker, eriti negatiivse HBsAg väärtusega. IgM antikehad toodetakse 3-5 nädala pärast. IgG antikehi hakatakse tootma 4. kuni 6. elukuuni ja need võivad püsida kogu elu. Kinnitage keha kontakti viirusega.

anti-HB-d - B-hepatiidi viiruse pinnaantigeeni antikehad kokku

Need ilmuvad aeglaselt, jõudes maksimaalselt 6-12 kuu pärast. Näidake varasemat nakkust või vaktsineerimisjärgsete antikehade olemasolu. Nende antikehade tuvastamine näitab immuunsuse taastumist ja arengut. Antikehade tuvastamine kõrge tiitriga haiguse esimestel nädalatel võib olla seotud fulminantse B-hepatiidi hüperimmuunse variandi tekkega.

anti-HBe - B-hepatiidi viiruse e-antigeeni antikehad

Ilmub 8.-16. Nädalal pärast nakatumist 90% -l patsientidest. Need tähistavad haiguse ägeda perioodi lõppu ja paranemisperioodi algust. Võib püsida kuni 5 aastat pärast haigust.

HBV (DNA) - B-hepatiidi viiruse DNA

Marker viiruse olemasolu ja replikatsiooni jaoks. PCR abil saab viiruse DNA-d määrata kvalitatiivselt või kvantitatiivselt. Tänu kvaliteetsele meetodile kinnitatakse B-hepatiidi viiruse esinemine kehas ja selle aktiivne paljunemine. See on eriti oluline keerukate diagnostiliste juhtumite korral. Viiruse mutantsete tüvedega nakatumisel võivad spetsiifiliste HBsAg ja HBeAg antigeenide testi tulemused olla negatiivsed, kuid viiruse leviku ja haiguse arengu oht nakatunud inimesel püsib.

Viirusliku DNA kvalitatiivsel määramisel on oluline roll B-hepatiidi varajases avastamises kõrge nakatumisohuga inimestel. Viiruse geneetiline materjal tuvastatakse veres mõni nädal varem kui HBsAg. Üle 6 kuu kestnud positiivne PCR-tulemus näitab kroonilist infektsiooni. Viiruse koormuse (viiruse DNA koguse veres) määramine võimaldab teil hinnata haiguse krooniliseks muutumise tõenäosust.

Ravi vajaduse indikaatoriteks on maksa transaminaaside kõrgenenud tase, mille PCR-i tulemus on positiivne. B-viirushepatiidi ravi ajal näitab viiruse DNA kadumine ravi efektiivsust.

Milleks uuringut kasutatakse??

  • Hinnata seroloogilist profiili;
  • selgitada haiguse staadium ja nakkavuse aste;
  • haiguse kinnitamiseks ja selle vormi täpsustamiseks (äge, krooniline, vedu);
  • jälgida kroonilise B-hepatiidi kulgu;
  • hinnata viirusevastase ravi efektiivsust.

Kui uuring on planeeritud?

  • Kui patsiendil ilmneb B-hepatiidi viiruse pinnaantigeen (HBsAg);
  • B-hepatiidi viirusesse nakatumise kahtluse ja seroloogiliste testide kaheldava tulemuse korral;
  • segatud hepatiidiga (kombineeritud viirushepatiit B ja C);
  • koos hepatiit B patsientide dünaamilise jälgimisega (protsessi staadiumi määramine muude spetsiifiliste nakkusmarkerite ühises uuringus).

Mida tulemused tähendavad??

Iga kompleksi kuuluva indikaatori kohta:

Äge B-hepatiit. Viirusel on "metsik" tüvi (looduslik) ja "mutantne" tüüp (tüüp). Viirusevastase ravi valimisel on eriti oluline viiruse tüve määramine. Mutantse viiruse tüved on pisut vähem ravitavad kui metsikud.

Krooniline B-hepatiit (HVGV). Seroloogilisi võimalusi on kolm:

  1. Minimaalse aktiivsusega HVGV (varem kasutatud terminit "HBsAg vedu");
  2. HBe-negatiivne HVHV;
  3. HBV-positiivne HVHV.

B-hepatiidi seroloogiliste markerite kombinatsioonide tõlgendamine

PCR - B-hepatiidi viiruse diagnoosimine (kvantitatiivselt)

Uuring hepatiit B (HBV) põhjustaja tuvastamiseks, mille käigus viiruse geneetilise materjali (DNA) ja selle koguse (viirusekoormus) sisaldus vereproovis määratakse kindlaks reaalajas toimuva polümeraasi ahelreaktsiooni abil.

HBV DNA saab tuvastada kontsentratsioonis, mis ületab lineaarse kontsentratsioonivahemiku alumist piiri. Lineaarne kontsentratsioonivahemik on vahemik, milles saab arvutada patogeeni täpse koopiate arvu. Selle analüüsi jaoks on detektorvõimendi abil määratud HBV DNA kontsentratsioonide lineaarne vahemik 7,5 × 102–1,0 × 108 koopiat / ml proovi.

Reaalajas polümeraasi ahelreaktsioon.

Koopia / ml (koopia milliliitri kohta).

Millist biomaterjali saab uurimiseks kasutada?

Kuidas uuringuks valmistuda??

Enne vere andmist ärge suitsetage 30 minutit.

Uuringu ülevaade

B-viirushepatiit (HBV) on nakkuslik maksahaigus, mida põhjustab DNA-d sisaldav B-hepatiidi viirus (HBV). Kõigi ägeda hepatiidi ja kroonilise viirusnakkuse põhjuste hulgas peetakse B-hepatiidi viirust maailmas üheks kõige tavalisemaks..

Venemaal ületab HBV vedajate arv 5 miljonit inimest.

Nakkuse allikas on HBV-ga patsient või asümptomaatiline viirusekandja. HBV kandub üle vere ja teiste kehavedelikega. Võite nakatuda kaitsmata suguelu kaudu, kasutades mittesteriilseid süstlaid, vereülekannet ja doonororganite siirdamist, ema võib nakatada lapse sünnituse ajal või pärast seda (nibude pragude kaudu).

Riskirühma kuuluvad: meditsiinitöötajad, kes võivad kokku puutuda patsiendi verega, hemodialüüsi saavad patsiendid, süstivate narkomaanide tarbijad, seksuaalselt aktiivsed inimesed, HBV-ga emadele sündinud lapsed.

Haiguse inkubatsiooniperiood on 4 nädalat kuni 6 kuud. B-viirushepatiit võib esineda nii kergete vormidena, mis kestavad mitu nädalat, kui ka pikaajalise kroonilise infektsiooni vormis. Hepatiidi peamised nähud: naha kollasus, palavik, iiveldus, väsimus, laboratoorsetes testides - kahjustatud maksafunktsioon ja hepatiit B viiruse spetsiifilised antigeenid.Akuutne haigus võib kiiresti põhjustada surma, muutuda krooniliseks infektsiooniks või lõppeda täieliku taastumisega. Arvatakse, et pärast ülekantud HBV-d moodustub stabiilne immuunsus. Krooniline viirushepatiit B on seotud tsirroosi ja maksavähi arenguga.

Viiruse kontsentratsioon veres ja ägeda viirushepatiidi B tulemus on omavahel seotud. Madala vireemia tasemega on nakatumise tõenäosus krooniliseks nullilähedane ja nakatunud inimene pole teistele ohtlik. Suure viiruskoormuse korral (10 ^ 5 koopiat / ml (2 * 10 ^ 4 RÜ / ml)) - suur viirusekoormus, aktiivne nakkusprotsess (vajalik on viirusevastane ravi).

  • > 1,0 * 10 ^ 8 koopiat / ml (> 4,8 * 10 ^ 7 RÜ / ml) - B-hepatiidi viiruse DNA tuvastati kontsentratsioonil, mis ületas lineaarset kontsentratsioonivahemikku.
    • B-hepatiidi viiruse DNA kvantifitseerimine on enne viirusevastast ravi eelduseks. Ravikuuri ajal tuleb analüüsi korrata 3-6 kuu pärast.
    • B-viirushepatiiti kombineeritakse sageli D-viirushepatiidiga.

    B-hepatiidi PCR-analüüs

    Hepadnaviridae perekonna DNA-d sisaldav viirus on B-hepatiidi otsene põhjustaja. B-hepatiidi PCR-analüüsi abil saate kindlaks teha DNA-viiruse olemasolu patsiendi veres. HBV DNA positiivne tulemus näitab nakkuse esinemist patsiendi veres. Väärib märkimist, et PCR-analüüsi abil diagnoosimine võimaldab mitte ainult kindlaks teha infektsiooni olemasolu, vaid ka selle kvantitatiivset koormust ja aktiivsust. See meetod on usaldusväärne, täpne ja korratav. HBV DNA kvantifitseerimist qPCR abil saab kasutada HBV ravi efektiivsuse jälgimiseks ja olla kasulik HBV loomuliku ajaloo mõistmisel.

    B-hepatiidi nakatumise protsess toimub koduse või seksuaalse kontakti kaudu või otsese kontakti kaudu nakatunud verega. Pärast nakatumist siseneb viirus maksarakkudesse, milles ta jätkab aktiivset paljunemist. Vereringe kaudu levivad patogeensed rakud kogu kehas. Väärib märkimist, et B-hepatiidi viirus on happe ja kõrge temperatuuri suhtes väga vastupidav. Ta suudab selle hämmastavaid omadusi säilitada kuus kuud..

    B-hepatiidi PCR tüübid

    Praeguseks on kaht tüüpi diagnoosi, mis on ette nähtud B-hepatiidi viiruse kahtluse korral: kvaliteetne PCR (võimaldab teil määrata viiruse esinemise veres absoluutse täpsusega) ja kvantitatiivne PCR (võimaldab teil määrata viiruse aktiivsuse astet).

    Kvalitatiivne PCR on ette nähtud HBV nakatumise kahtluse korral või kui muud diagnostilised meetodid ei andnud selget tulemust. Seda tüüpi PCR-analüüsi on äärmiselt lihtne dešifreerida: negatiivne (viirust veres ei tuvastata), positiivne (viirus tuvastatakse veres). Kvalitatiivse analüüsi peamine ülesanne on kindlaks teha nakatunud rakkude olemasolu haiguse varases staadiumis. Kui viirus diagnoositi kaks nädalat pärast väidetavat nakatumist, on ravi efektiivsus suurusjärgu võrra suurem. Kui viirus on veres umbes kaks kuud, omandab haigus kroonilise vormi, ei saa seda seetõttu täielikult ravida.

    Kui kvalitatiivne diagnoos kinnitab HBV esinemist veres, määrab arst kvantitatiivse analüüsi.

    Kvantitatiivne analüüs võimaldab teil kindlaks teha viiruse arengu aktiivsuse patsiendi kehas. Seda tüüpi PCR-analüüs on ette nähtud:

    • haiguse staadiumi kindlaksmääramiseks;
    • jälgida rakendatud ravi efektiivsust;
    • määrata viiruse resistentsuse tase konkreetse ravimi suhtes;
    • ravimite valimiseks.

    Veres mõõdetakse viiruse kvantitatiivseid näitajaid RÜ-des milliliitri kohta või DNA-des milliliitri kohta.

    Juhul, kui arst määrab kohe kvantitatiivse diagnoosi ilma kvaliteeti kontrollimata, on see näitaja 75 RÜ milliliitri kohta. Kui leitakse vähem rahvusvahelisi ühikuid, siis tulemus - HBV ei tuvastata, kui näitajad ületavad normi, diagnoositakse viirushepatiit B.

    Kvantitatiivse analüüsi dekodeerimine

    Järgmisi indikaatoreid (koopiates milliliitri kohta) peetakse HRV normiks B-hepatiidi korral: vähem kui 10 3 - viirus on passiivne; 10 4 kuni 10 5 - viirus on tavaliselt passiivne; 106 - viirus on aktiivne; 107 - kõrge aktiivsusega viirus.

    Kvantitatiivsete näitajate põhjal saab absoluutse täpsusega kindlaks teha haiguse vormi (kanduv, äge või krooniline), viiruse reageerimise ravile, vajaduse lisadiagnostika järele.

    B-hepatiidi krooniline vorm tuvastatakse, kui viiruse aktiivsus on 105 5 koopiat milliliitri kohta. Vedu diagnoositakse juhul, kui kogus on alla 105 eksemplari milliliitri kohta..

    Raviperioodil on vaja (regulaarselt iga kolme kuu tagant) teha korduv kvantitatiivne diagnoos, et õigeaegselt kindlaks teha, millal viirus areneb kasutatavate ravimite suhtes immuunsus, ja muuta tehnikat. Kui kõik uuringud on tehtud õigesti ja valitud on tõhus ravi, näitab korduv analüüs (pärast kolmepäevast ravi) patogeensete rakkude aktiivsuse vähenemist vähemalt kaheksakümmend viis protsenti..

    Maksa biopsia tehakse siis, kui kuue ravikuu jooksul on ALAT väärtused kaks korda tavalised ja PCR-diagnostika näitab alla 10 5 koopiat vere milliliitri kohta.

    Küsitluse ettevalmistamine

    Analüüsiks on vajalik venoosne veri. Kõige täpsemate tulemuste saamiseks peate valmistuma protseduuriks: keelduda söömast vähemalt kaheksa tundi enne vereproovide võtmist; kahe päeva jooksul meditsiinilisest ravist keeldumiseks (ilma arsti hoiatamata ravimite võtmisest); enne vere loovutamist peate veetma kakskümmend minutit puhkeolekus; Kaksteist tundi enne protseduuri loobuge sporditreeningutest, alkoholist, suitsetamisest ja rasvarikka toidu söömisest.

    Tähtis: kui diagnoos on vajalik kuni viie kuu vanusele lapsele, vajab ta enne vereprooviprotseduuri kuuskümmend minutit, et anda iga kümne minuti järel supilusikatäis keedetud vett.

    Kokku võtma

    B-hepatiidi PCR-analüüs on tänapäeval kõige täpsem meetod viiruse diagnoosimiseks. Meetod võimaldab teil tuvastada haiguse muteerunud ja varjatud vorme, diagnoosida haigus nakkuse esimestel päevadel, seetõttu valida kõige tõhusam ravi. Labori assistent võrdleb analüüsi tulemusi normiga ja viib need seejärel järeldusele. Andmeid töödeldakse mõne päeva jooksul. PCR-analüüsi saatekirja saamiseks peate võtma ühendust hepatoloogi, nakkushaiguste spetsialisti või viroloogiga. Oluline on meeles pidada, et mida kiiremini saate arsti juurde, seda kiiremini tulemusi saadakse, seda tõhusam on ravi..

    Rohkem värsket ja asjakohast terviseteavet leiate meie Telegrami kanalilt. Telli: https://t.me/foodandhealthru

    Eriala: nakkushaiguste spetsialist, gastroenteroloog, pulmonoloog.

    Kogu kogemus: 35 aastat.

    Haridus: 1975–1982, 1MI, San Gig, kõrgem kvalifikatsioon, nakkushaiguste spetsialist.

    Teaduskraad: kõrgeima kategooria arst, arstiteaduste kandidaat.

    Koolitus:

    1. Nakkushaigused.
    2. Parasiithaigused.
    3. Hädaolukorrad.
    4. HIV.

    B-hepatiidi test

    B-viirushepatiiti ei esine eriti sageli, kuna on olemas vaktsiin, mis hoiab ära nakkuse patogeeni viirusega. Lapsi vaktsineeritakse kohe pärast sündi ning hilisem vaktsineerimine toimub täiskasvanueas.

    B-hepatiidi levimus on aga kõrge. Selle haiguse äratundmine on üsna lihtne. On vaja ainult läbi viia PCR-uuring (polümeraasi ahelreaktsioon). Analüüsi abil saate tuvastada B-hepatiidi DNA. Täpsema diagnoosi saamiseks viiakse läbi kvantitatiivne uuring..

    Nad kohtlevad BPV-d rangelt konservatiivsel viisil. Patsiendile on ette nähtud interferoonid, multivitamiinide kompleksid, hepatoprotektorid, viirusevastased ravimid. Vaatleme üksikasjalikumalt haiguse patogeneesi ja uurime välja, millistel juhtudel on vaja PCR-uuring võtta ja kuidas seda õigesti dešifreerida.

    B-viirushepatiidi patogenees ja tunnused

    B-hepatiit (lühendatult HRV) on viirushaigus, mille puhul maksarakkudes täheldatakse põletikulist protsessi. Haigus võib põhjustada maksa suurenemist ja selle struktuuri muutust. Õigeaegse ravi puudumisel lakkab hepatiit tsirroosist või rasvasest hepatoosist.

    BPV põhjustajaks on DNA-d sisaldav viirus, mis pärineb hepatadaviiruste perekonnast (lühendatult HBV või HBV). Nakkusetekitaja antigeen avastati alles 1964. aastal. Viiruse eripäraks on see, et see on keemiliste ja füüsikaliste tegurite suhtes äärmiselt vastupidav..

    Nii ei sure nakkusetekitaja järskude temperatuurimuutuste, külmumise ja ka pikaajalise kokkupuute korral happelise keskkonnaga. Lisaks väidavad arstid, et HBV võib püsida toatemperatuuril kuni mitu nädalat. Nakkusetekitaja võib näiteks püsida nakatunud inimese habemenugadel, vereplekkides, mitmesugustel meditsiinilistel instrumentidel. Erinevate hinnangute kohaselt kannatab ägedate hingamisteede infektsioonide all umbes 300 tuhat inimest.

    Nakkusetekitaja edasikandmiseks on neli viisi:

    1. Seksuaalne. Kaitsmata seksuaalse kontakti korral tekivad suguelundite limaskestadele traumad, mille tagajärjel on viirusel mitu korda kergem pääseda vereringesse ning sealt edasi portaalveeni ja maksa. HBV ei levi kaitstud seksuaalvahekorra ajal. Muide, suudluste ja kallistustega nakatumist peetakse võimatuks.
    2. Vertikaalne viis. Nakkusetekitaja võib langeda üle platsenta. Samuti on võimalik nakatumine lapse läbimisel sünnikanali kaudu. Kuid rinnapiima kaudu on peaaegu võimatu nakatuda.
    3. Kodused. Võite nakatuda, kui terve inimene kasutab samu isiklikke hügieenitooteid koos viirusekandjaga.
    4. Parenteraalne, see tähendab vere kaudu. Nii saab HBV nakatuda hambakliinikutes, tätoveerimisstuudios, ilusalongides, maniküüri-, pediküüri- ja augustamistubades. Nakatumine on võimalik vereülekande ajal, elundisiirdamise ajal, hemodialüüsi ajal, kirurgiliste sekkumiste ajal.

    B-hepatiiti ei edastata õhus olevate tilkade kaudu. Ja kokkupuutel inimese bioloogiliste vedelikega (sperma, sülg, siseorganite eritised, menstruatsiooni ja tupe sekretsioonid) jääb nakatumise tõenäosus.

    Viiruse DNA PCR-testimine

    Analüüsi ettevalmistamine

    Ülalpool on juba märgitud, et diagnoosi saamiseks peate läbima B-hepatiidi PCR-i. Uuringu täpsuse tagamiseks peab patsient järgima mitmeid lihtsaid reegleid. Esimene ja kõige olulisem on võtta analüüs tühja kõhuga. Ainult nii saate täpse tulemuse. Õppepäeval võite juua vett.

    Samuti on uuringu eelõhtul tungivalt soovitatav mitte tarvitada alkohoolseid jooke. Ideaalis hoiduge alkoholi tarbimisest vähemalt 3–5 päeva enne vereproovide võtmist. On juhtumeid, kui alkoholi tarvitamise tõttu sai inimene valepositiivse või valenegatiivse tulemuse. Ehkki täna peetakse seda peaaegu võimatuks, kuna PCR on väga täpne analüüs.

    • Õppepäeval suitsetamine keelatud.
    • Dieedi järgimise eelõhtul.
    • Arsti soovitusel lõpetage ravimite võtmine, mis ühel või teisel määral suudavad tulemust mõjutada.
    • Vältige treenimist.

    Kui inimene on juba viirusevastases ravis, siis ei ole vaja PCR-i eelõhtul ravimite võtmist katkestada. Eralaborites (Sinevo, Hemotest jne) läbiviidava tervikliku PCR-uuringu hind algab 2000 rublast..

    Kvalitatiivne analüüs

    Kvaliteetne PCR-analüüs aitab tuvastada HRV DNA-d. Ravim on ette nähtud mitte ainult B-hepatiidi kahtluse korral. Kvalitatiivne uuring on soovitatav neile inimestele, kes saavad läbi viirusvastase ravi või on selle lõpetanud. PCR-i saab anda inimestele, kes elavad nakatunud inimesega.

    Kvaliteetse PCR-i eesmärk on tuvastada viirusetekitaja DNA. Lahtikrüptimine on väga lihtne. Kvalitatiivne analüüs annab kas positiivse või negatiivse tulemuse. Esimesel juhul tuvastati viirus, teisel - ei.

    Kuid on üks hoiatus. Hoolimata asjaolust, et PCR on üsna täpne analüüs, võite saada valepositiivse või valenegatiivse tulemuse. Hepatoloogide sõnul on parem testi kaks korda erinevates laborites läbida.

    Kvantitatiivne analüüs

    B-hepatiidi kvantitatiivne analüüs viiakse läbi ka ilma tõrgeteta, kui kahtlustatakse HRV esinemist kehas. Mis on kvantitatiivne uurimistöö ja miks seda vaja on? Nagu nimest järeldada võib, aitab analüüs kindlaks teha nakkusetekitaja koguse kehas. Uuringu abil saab arst hinnata patoloogia tõsidust.

    Samuti tuleks kvantitatiivset analüüsi teha nendele inimestele, kes juba saavad ravi. Selle abil saate määrata terapeutiliste meetmete tõhususe ja vajadusel kohandada.

    Viiruse mõõtühik on ME / ml. Mõnikord kasutatakse DNA / ml (eksemplaride arv). Keskmine väärtus on 1 RÜ / ml = 5 koopiat / ml. Kui analüüsi tulemus on alla 75 RÜ / ml, siis patsiendil HRV ei ole.

    Kvantitatiivse uuringu dekodeerimine on järgmine:

    1. Kuni 2 * 10 5 koopiat / ml. Tähendab, et viirus pole eriti aktiivne. Sellistel juhtudel on HRV ravimine suhteliselt lihtne..
    2. 2 * 10 5 kuni 2 * 10 6 koopiat / ml. Tähendab, et viiruse aktiivsus on keskmine. Nakkusetekitaja on üsna aktiivne ja põletikulise protsessi kroonilisuse tõenäosus on üsna kõrge..
    3. 2 * 10 6 kuni 2 * 10 7. Viremia on suurepärane. Viiruse aktiivsus on väga kõrge, põletikuline protsess on reaktiivne.

    Täiendavad uuringud B-hepatiidi kahtluse korral

    Lisaks PCR-le peab patsient läbima ELISA (ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs). Selle abil saate tuvastada VRV-vastaseid antikehi. Antikehade olemasolul on patsiendil tõenäoliselt viirushaigus. Mõelge peamistele antikehadele, mõõtühik on indeks.

    Üks olulisemaid on HbsAb. Selle lühendi all on peidetud viiruse pinnavalgu antikehad. Kui immuunsüsteem puutub kokku BPB valguga, toodetakse spetsiifilisi antikehi, mis kinnituvad viirusega ja takistavad selle sisenemist maksarakkudesse..

    Ikka on olemas anti-HBc (kokku) (HBcAb). Nad on hepatiit B viiruse tuumavalgu antikehad, kuid see pole nii lihtne. Nende antikehade olemasolu võib näidata, et hepatiiti oli varem. See tähendab, et selle markeri olemasolu ei tähenda, et põletikuline protsess eksisteerib praegu.

    Samuti saab tuvastada anti-HBc IgM (HBcAb IgM). Need moodustuvad haiguse arengu algfaasis.

    Kui ensüümi immuunanalüüsist selgus, et inimesel on IgM anti-HBc (HBcAb IgM) ja anti-HBe (HBeAb), siis see näitab, et põletikuline protsess on äge ja patsiendi vereinfektsioon on väga kõrge. Tavaliselt need antikehad puuduvad..

    Üldise kliinilise pildi hindamiseks võib lisaks PCR-ile ja ELISA-le määrata patsiendi:

    • Üldine vereanalüüs.
    • Verekeemia. Uurime maksaensüümide taset (ASAT, ALAT, aluseline fosfataas, otsene ja kaudne bilirubiin, GGT). B-hepatiidi korral suureneb PF tase.
    • Maksa ultraheli. Põletikuline protsess viib asjaolu, et elund muutub turseks, selle struktuur muutub veidi, fibroosikohtade olemasolu on võimalik.
    • Maksa biopsia. See näeb ette maksarakkude kogumise ja nende edasise histoloogilise uurimise. Tuleb kasutada diferentsiaaldiagnostika osana.

    Vajadusel võib soovitada C-hepatiidi viiruse RNA PCR-testi, kuna B-hepatiidi ja C-hepatiidi samaaegse nakatumise juhtumid on üsna tavalised. Pealegi kanduvad mõlemad haigused parenteraalselt.

    Mida teha, kui kehas on viirus?

    Kui kvaliteeditesti tulemus oli positiivne ja patsiendil diagnoositi viirushepatiit B, peab ta läbima põhjaliku ravi. Terapeutiliste meetmete kava koostamisel võetakse arvesse antikehade testi tulemusi ja kvantitatiivsete PCR-uuringute tulemusi.

    Viiruse hävitamiseks ja põletikulise protsessi peatamiseks aitavad spetsiaalsed viirusevastased ravimid. Valitud ravimid on. Keha resistentsuse suurendamiseks nakkusetekitajate vastu on ette nähtud interferoonid, sealhulgas Interal-P, Intron A, Pegasis, Pegintron.

    1. Hepatoprotektoreid on ette nähtud. Need aitavad stabiliseerida lipiidide ja valkude metabolismi, vähendavad maksa transaminaaside aktiivsust, peatavad põletikulise protsessi maksa parenhüümis. Samuti normaliseeritakse hepatotoprotektorite mõjul maksa detoksikatsioonifunktsioon, suureneb sapi süntees ja stabiliseerub selle läbimine. B-hepatiidi korral on valitud ravimid Urdoxa, Ursofalk, Liv 52, Karsil Forte, Essential Forte N, Resalyut Pro.
    2. Dieeti kohandatakse. Patsient peab loobuma toodetest, mis maksa üle koormavad. Need on maiustused, rasvased toidud, mugavustoidud, vürtsikad köögiviljad, hapud puuviljad, värsked kondiitritooted.
    3. Näidatakse alkohoolsete jookide keeldumist, kuna need halvendavad põletikulist protsessi ja on halvasti kombineeritud viirusevastaste ravimitega.

    VRV-d on täiesti võimalik ravida. Põletikulise protsessi kroonimine toimub ainult 10-20% patsientidest.

    Haiguse ennustamine ja ennetamine

    B-hepatiidi parim ennetamine on õigeaegne vaktsineerimine. Seda tehakse kohe pärast sündi ja seejärel täiskasvanuks saamisel. Kui kaua vaktsineerimisjärgne immuunsus kestab, on raske öelda.

    Algselt usuti, et inimene on veenilaienditega kokkupuutumise suhtes vastupidav 5–7 aastat pärast vaktsineerimist. Kuid XX sajandi 80-ndatel aastatel tehtud uuringud lükkasid selle ümber. Arstid leidsid, et immuunsus võib püsida kuni 25 aastat. Tervishoiutöötajatel ja inimestel, kelle töö hõlmab kokkupuudet vere ja muude kehavedelikega, soovitatakse siiski vaktsineerida iga 5 aasta tagant..

    B-viirushepatiidi prognoos on soodne. Põletikulise protsessi kroonimine on üsna haruldane, eriti kui inimene on õigeaegselt abi palunud. Kui põletikulist protsessi alustatakse, on patoloogia krooniliseks muutumise tõenäosus üsna kõrge.

    Enneaegne ravi võib põhjustada mitmesuguseid tagajärgi. Niisiis põhjustab krooniline HRV sageli fibroosi arengut, mis lakkab lõpuks tsirroosiks.

    Samuti võib põletikulise protsessi taustal areneda maksavähk, sapiteede düskineesia, rasvhaperoos, äge koletsüstiit, kolangiit. On veel üks funktsioon. BPV-ga võib patsient nakatuda D-hepatiiti. Viimase replikatsioon on võimalik ainult HBV-ga.

    B-hepatiidi PCR: meetodi spetsiifilisus

    Üks tõsisemaid patoloogiaid 21. sajandil oli nakkus, mis oli põhjustatud hepatiit B-viirusest. Riiklikku vaktsineerimiskavasse lisati vaktsiin, mis kaitseb inimest haiguse eest vahetult sündides.

    Miljonites on aga ohtlike mikroorganismide allaneelamise tagajärjel kannatavaid inimesi. Viirus levib kergesti kaitsmata seksuaalse kontakti kaudu, samuti vere mikroosakestega. Seetõttu on B-hepatiidi PCR-uuring eriti oluline viiruse levimuse osas.

    Uuringu näidustused

    Meetod ei ole sõeluuring, seda kasutatakse vastavalt teatud kliinilistele näidustustele. Massdiagnoosimiseks kasutatakse tavaliselt Austraalia antigeeni vereseerumi testi. Kuid üsna suur hulk inimesi vajab igal aastal B-hepatiidi PCR-diagnostikat.

    Uuringu näidustused on:

    • HBsAg positiivne test - viirushepatiidi antigeenide olemasolu;
    • viiruse põhjustatud äge infektsioon;
    • viiruskoormuse kvantifitseerimine;
    • ravi efektiivsuse jälgimine;
    • terapeutilise taktika väljavaadete hindamine.

    Kuid paljudes olukordades ei taga Austraalia antigeeni klassikaline skriinimine haiguse esinemise osas täpset kindlust. Teatud aja jooksul on viirus juba veres, kuid immuunsüsteem ei reageeri sellele veel aktiivselt. Seetõttu kasutatakse PCR-meetodit mitmesuguste patoloogiliste seisundite korral.

    Kõige olulisemad on järgmised B-hepatiidi PCR-i kliinilised näidustused:

    1. tundmatu päritoluga kollatõbi;
    2. suurenenud aminotransferaasid;
    3. pikenenud subfebriili seisund;
    4. madal immuunsuse seisund;
    5. ultraheli abil tuvastatud väljendunud muutused maksas;
    6. hepatiidi diferentsiaaldiagnostika;
    7. pikaajaline düspeptiline sündroom.

    Kõigis kliinilistes olukordades diagnoositakse algselt hepatiit B viiruse antigeenide määramisega, kuid kahtlaste tulemustega ilmsete sümptomite olemasolul, mis ei sobi konkreetse haiguse raamistikku, viiakse läbi PCR-uuring.

    PCR-diagnostika olemus

    Selle tulemusel saadakse isegi väikese koguse mikroorganismide korral inimkehas täpsed ja positiivsed tulemused. Diagnoosi usaldusväärsus on 98%, mis annab peaaegu täieliku garantii uuringu täpsusele..

    Bioloogiliseks materjaliks on venoosne veri, puhastatud lümfotsüütilised rakud või maksa biopsia. Viimast võimalust saab operatsiooni ajal, kui ilma ilmse kliinilise pildita tuvastatakse tõsised elundimuutused..

    Analüüsi ettevalmistamine ja etapid

    Kliiniliste näidustuste olemasolu välistab vajaduse spetsiaalselt analüüsideks ette valmistada. Testi tulemuse moonutamise vältimiseks on soovitatav järgida vereseerumi kogumise üldeeskirju. Ettevalmistus sisaldab:

    • tühja kõhuga veri - hommikul on ebasoovitav süüa toitu;
    • alkohoolsete jookide väljajätmine 3 päeva enne analüüsi;
    • ärge suitsetage hommikul;
    • ärge sööge rasvaseid toite 36 tundi enne analüüsi, vastasel juhul on PCR-i tulemus mitteinformatiivne;
    • annetage verd hommikul.

    Kõik koolituse nüansid on olemuselt puhtalt soovituslikud. B-hepatiidi polümeraasi ahelreaktsioonil pole vastunäidustusi. Kiireloomuliste vajaduste korral viiakse uuringud läbi igal ajal..

    Allpool on toodud PCR-diagnostika etapid, võttes arvesse manipulatsioonide lõpetamiseks kuluvat aega:

    1. Bioloogilise materjali võtmine. 98% juhtudest uuritakse vereseerumit. Sel juhul ei võta analüüsimiseks proovi võtmise esimene samm kauem kui 30 minutit. Venipunktsiooni teel võetud veri.
    2. Materjali toimetamine laborisse. Veri pumbatakse spetsiaalsesse torusse ilma säilitusaineta, kui test viiakse läbi samal päeval. Transport võtab tavaliselt mitte rohkem kui 3 tundi.
    3. B-hepatiidi PCR-test. See viiakse läbi molekulaarbioloogilises laboris. Spetsiaalsesse mahutisse lisatakse rikastussegu, mille abil määratakse viiruse DNA elemendid. Tavaliselt võtab see 4 tundi.
    4. Tulemuste tõlgendamine labori assistendi poolt. Uuringu käigus saadud andmete analüüs. Tavaliselt ei kesta rohkem kui 2 tundi.
    5. Järelduse väljastamine.

    Suurtes laborites, kus PCR-i tehakse iga päev, ei võta diagnoosi kõik etapid rohkem kui 1 päev. Tavapärastes kliinikutes tehakse reagentide säästmiseks B-hepatiidi PCR sageli 1 või 2 korda nädalas. Sel juhul suureneb järsult uuringu tulemuste saamise aeg..

    Kui diagnoosi pole varem kinnitatud, siis PCR-i suhtes absoluutset näidustust ei ole. See tähendab, et juurdepääs keskveeni kaudu on ebapraktiline, kuna polümeraasi ahelreaktsioon B-hepatiidile ei ole skriinimine.

    Absoluutsete näidustuste olemasolul, mis on seotud vajadusega kontrollida vireemiat (viiruse hulk veres), tehakse keskveeni punktsioon ja materjal võetakse raskesti ligipääsetavast kohast. See vere võtmise meetod nõuab anesteesiat ja vaatlust päevasel ajal võimalike komplikatsioonide ohu tõttu..

    PCR-diagnostika tüübid

    Inimese bioloogilise materjali uurimiseks polümeraasi ahelreaktsiooni abil on kaks võimalust - kvalitatiivne ja kvantitatiivne. Need erinevad ainult tulemuste tõlgendamise etappides..

    Kvalitatiivse analüüsi abil saab kindlaks teha ainult viiruse esinemise fakti inimkehas. Tulemus näeb välja ainult üks fraas - positiivne või negatiivne.

    Meetod on hea viiruse varajaseks avastamiseks inkubatsiooniperioodil, kui klassikaline skriinimine ei anna veel täpseid andmeid antikehade olemasolu kohta. Seda kasutatakse ka kliinilises praktikas kahtluste lahendamiseks erinevate haiguste diferentsiaaldiagnostikas..

    B-hepatiidi kvantitatiivne PCR-analüüs tähendab vireemia kohta täpsete andmete saamist. Hepatiidi koormuse määramiseks loendab laboriarst viiruse koopiate arvu. See on vajalik viirusevastase ravi hindamiseks..

    Kui pärast ravi määramist suureneb viiruse eksemplaride arv, on vajalik kasutatud ravimite korrigeerimine. Analüüs on oluline haiguse progresseerumise hindamisel. Mida rohkem viiruse eksemplare on veres haiguse dünaamikas, seda pahaloomulisem ja ohtlikum on maksakahjustus. Ägeda B-hepatiidi korral mõjutab vireemia tase kroonilise haiguse prognoosi.

    Tulemuste dešifreerimine

    B-hepatiidi kvalitatiivse PCR-meetodi abil saadakse tulemus, tuvastades viiruse olemasolu bioloogilises materjalis. Mikroorganismi avastamise korral antakse järeldus positiivse polümeraasi ahelreaktsiooni kohta. See tähendab, et inimene on kas haige või on selle kandja.

    Kvalitatiivne uuring on lihtsam, kuna see ei nõua viiruse koopiate loendamist. Tõlk võib tõlgendada sellise uuringu tulemusi ilma arsti sekkumiseta. Seetõttu kasutatakse seda tehnikat sageli provintsipiirkondades, kus puudub professionaalne personal..

    Viiruse kvantitatiivne määramine tähendab, et PCR-diagnostika aruanne kajastab mitte ainult nakatumise fakti, vaid ka mikroorganismi eksemplaride arvu. Tehnika nõuab arsti kohustuslikku sekkumist, seetõttu viiakse see läbi ainult suurtes laborites.

    Allpool on toodud kvantitatiivse analüüsi tulemuste peamised võimalused:

    • Koopiaid pole - tulemus on negatiivne. See valik on võimalik, kui patsient on terve või vireemia on alla 20 RÜ / ml, see tähendab alla reagendi diagnostiliste võimete. Kui varem määrati B-hepatiit, näitab see tulemus ravi suurt efektiivsust..
    • Alla 10 * 2 eksemplari. Soodne tulemus näitab madalat vireemiat. Haigus on olemas, kuid raviprotsess on edukas ja ägeda hepatiidi korral on kroonilisuse tõenäosus väga väike..
    • 10 * 2 kuni 10 * 8 eksemplari. Keskmine tulemus. Seda tuleks tõlgendada sõltuvalt varasematest tulemustest. Kui varem analüüsi ei tehtud, siis näitab see tulemus haiguse kiiret progresseerumist, mis nõuab viivitamatut ravi. Kui eelmistes proovides oli viiruse hulk suurem, siis toimub töötlemine keskmise efektiivsusega.
    • Rohkem kui 10 * 8 eksemplari. See on kõige ebasoodsam variant. Näitab haiguse kiiret progresseerumist, terapeutiliste meetmete ebaefektiivsust ja ägeda hepatiidi korral kroonilisuse suurt tõenäosust..

    B-hepatiidi PCR-i tulemus pole patsiendile ette nähtud. Seda vajab ainult raviarst, kes kliiniliste kaalutluste põhjal andmeid optimaalselt tõlgendab. Seetõttu peate isegi labori negatiivse vastuse korral alati arstiga nõu pidama.

    Kõrge vireemia korral ei saa te arsti visiiti edasi lükata. Ravi on vaja viivitamatult korrigeerida, kuna sellest sõltub patsiendi elu.

    On vastunäidustusi. On vaja konsulteerida spetsialistiga.

    B-hepatiidi viirus, DNA määratlus (HBV-DNA) Kvaliteet. vereseerumis

    B-hepatiidi viiruse (B-hepatiidi viiruse) DNA määramine vereseerumis polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) abil reaalajas tuvastamisega.

    Avastatud fragment on hepatiit B viiruse spetsiifiline DNA sait; määramise spetsiifilisus - 100%; tuvastustundlikkus - 20 RÜ / ml.

    • Ennetavad sõeluuringud (B-hepatiidi DNA on ägeda infektsiooni kõige varasem marker).
    • HBsAg-negatiivse infektsiooni uuringud.
    • Kontaktküsitlused.
    • Segase etioloogiaga hepatiidi diagnoosimine - juhtiva viiruse tuvastamine.
    • Viiruse aktiivse replikatsiooni staadiumi tuvastamine kroonilises seisundis.
    • Teraapia jälgimine.
    • Maksa tsirroos.
    • Nõrkus, halb enesetunne, väsimus, isutus, iiveldus, raskustunne paremas hüpohondriumis, maksa suurenemine, samuti lihaste, liigeste valu.
    • Kollatõbi, naha sügelus, laienenud põrn, vaskulaarsed "ämblikud", mõnel juhul peopesade ja jalgade punetus.

    Uurimistulemuste tõlgendamine sisaldab teavet raviarsti jaoks ja see pole diagnoos. Selles jaotises sisalduvat teavet ei saa kasutada enesediagnostikaks ega eneseraviks. Arst paneb täpse diagnoosi, kasutades nii selle uuringu tulemusi kui ka vajalikku teavet muudest allikatest: ajalugu, teiste uuringute tulemusi jne..

    B-hepatiidi viirus, DNA (HBV, PCR) plasma, kvaliteet.

    Õppeteave

    PCR-diagnostika

    B-hepatiidi viirus (kvalitatiivne analüüs)

    B-hepatiit - DNA-d sisaldava B-hepatiidi viiruse (HBV, HBV) põhjustatud viirusnakkus koos maksa parenhüümi primaarse kahjustusega. Nakkuse allikas on haige inimene. Ülekande teed: pärast vereülekannet emalt lootele ja vastsündinule seksuaalselt, naha ja limaskestade terviklikkust kahjustavate manipulatsioonide ajal keskendutakse perekonnas mikrotrauma kaudu (hambaharjad, käärid, kammid, pesulapid, rätikud, nõud jne).. Inkubatsiooniperiood kestab 42-180 päeva. Preicteric periood on 1 päev kuni 4 nädalat, kui on kerge temperatuuri tõus, iiveldus, nõrkus, peavalu ja kõhuvalu. Itseerse perioodiga kaasneb pigmendi metabolismi rikkumine: märgitakse naha, sklera, suu limaskesta, naha sügeluse, tumeda uriini (õllevärvi) ja heledate väljaheidete ikterilist värvust. PCR-diagnostikameetod on kõige usaldusväärsem ja võimaldab tuvastada viiruse DNA patsiendi vereseerumis. Positiivne analüüs on iseloomulik haiguse ägedale staadiumile ja viirusekandjale.

    C-hepatiidi PCR

    PCR (või polümeraasi ahelreaktsioon) on Carey Mullis (USA) juurutatud patogeeni DNA ja RNA diagnoosimise laboratoorne meetod. Haigusetekitaja viiruse tuvastamiseks piisab ülimalt tundlikust PCR-analüüsist vaid ühest nahas või kehavedelikus leiduvast molekulist.

    PCR tüübid

    Kroonilise C-hepatiidi vere PCR-analüüsi on kolme tüüpi - kvalitatiivne, kvantitatiivne ja analüüs, mis määravad viiruse genotüübi.

    C-hepatiidi kvalitatiivne PCR-analüüs viiakse läbi nende patsientide jaoks, kelle ELISA analüüs näitas HVGS-i antikehi. Kvalitatiivse PCR-analüüsi tulemust tähistatakse sõnadega “RNA tuvastatud” või “RNA-d ei tuvastatud”. Testisüsteemid, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml, suudavad tuvastada patogeeni minimaalse koguse veres. Viiruse madalama kontsentratsiooni korral võib analüüs anda valenegatiivse tulemuse. Vigade vältimiseks peavad PCR-diagnostikale spetsialiseerunud laborid olema varustatud ülitundlikkuse kontrollsüsteemidega. Näiteks kasutab Invitro labor katsesüsteeme tundlikkusega 15 RÜ / ml. Patsientidel ja arstidel on õigus nõuda laboritöötajatelt testi tundlikkuse andmeid..

    C-hepatiidi kvantitatiivne PCR-analüüs on vajalik viiruse kontsentratsiooni (või vireemia) määramiseks veres. Tulemused räägivad numbreid. Kui 1 ml veres leitakse 2 miljonit RÜ, on tulemus järgmine - 2 × 10 * 6 RÜ / ml. Mõnes laboris kasutatakse erinevat indikaatorit - koopiate arv 1 ml vere kohta (1 RÜ on 4 RNA koopiat). Selgub, et 2 × 10 * 6 RÜ / ml võrdub viiruse RNA 8 × 10 * 6 koopiaga (8 miljonit koopiat) 1 ml veres.

    Genotüpiseerimine määrab, millisesse kuuest genotüübist viirus kuulub. Patsiendi kliinilist pilti, komplikatsioonide määra ja edasist prognoosi mõjutab patogeeni genotüüp. Viiruse genotüübi õige määramine võimaldab valida ravimite kombinatsiooni ja määrata ravi kestuse.

    Näidustused analüüsiks

    HCV esinemise kinnitamiseks on ette nähtud PCR-analüüs, mis aitab patogeeni tuvastada ja ravi alustada. Näpunäited ametisse nimetamiseks:

    • Patsiendil on maksa põletiku tunnuseid.
    • Ennetavate uuringute sõeluuring.
    • On vaja uurida inimesi, kes puutuvad kokku hepatiidihaigetega.
    • Diagnoositakse segapäritolu hepatiit ja tuleb kindlaks teha peamine põhjustaja.
    • Määratakse patogeeni paljunemisaktiivsuse tase kroonilistel patsientidel..
    • Patsiendil diagnoositakse tsirroos.
    • On vaja hinnata teraapia efektiivsust.

    Ettevalmistus hepatiidi PCR-diagnoosimiseks

    Protseduur viiakse läbi hommikul tühja kõhuga, veri võetakse veenist..

    Patsient peab järgima järgmisi reegleid:

    • Ärge sööge toitu 10 tundi enne protseduuri. Lubatud on ainult puhas vesi..
    • Ärge suitsetage 4 tundi enne manipuleerimist ja ärge jooge alkoholi päev enne analüüsi.
    • Enne protseduuri vältige füüsilist ja psühholoogilist stressi.
    • Ärge võtke ravimeid 2 päeva enne vereproovide võtmist. Kui patsient võttis mingil põhjusel ravimeid, tuleb sellest teavitada labori abistajat (teatud ravimite kasutamine põhjustab ekslikult positiivse tulemuse).

    PCR-uuringute tulemuste dekodeerimine

    ELISA ja PCR analüüsi dešifreerimine on hepatoloogi või nakkushaiguste spetsialisti ülesanne. Vajalik on ka biopsia, vere biokeemilise analüüsi ja ultraheliuuringu tulemused. PCR-analüüsi tulemusi võib dešifreerida ainult kvalifitseeritud arst, kes peaks nende alusel ravi määrama. Allpool on toodud tabelid C-hepatiidi viiruskoormuse dekodeerimiseks.

    Kvalitatiivne analüüs. Dekrüptimine

    TuvastatudPatsient on nakatunud, sest selle bioloogilisest materjalist leitud viiruse RNA.
    Ei leitudPatsient pole nakatunud või viiruse RNA kogus on alla tundlikkuse piiri.

    Kvantitatiivne analüüs. Dekrüptimine

    Ei leitudInimene on terve. Viiruse RNA-d biomaterjalist ei leitud või selle kontsentratsioon on alla tundlikkuse piiri.
    Kuni 1,8 * 10 ^ 2 RÜ / mlViiruse RNA kontsentratsioon on alla kvantifitseerimise vahemiku. Sel juhul tuleb tulemuse tõlgendamisel olla ettevaatlik. Sageli on vaja teha korduvaid uuringuid..
    Kuni 8 * 10 ^ 5 RÜ / mlMadal viiruskoormus C-hepatiidi korral näitab viiruse kontsentratsiooni langus reeglina edukat ravi.
    Suurem kui 8 * 10 ^ 5 RÜ / mlC-hepatiidi kõrge viiruskoormus.
    Suurem kui 2,4 * 10 ^ 7 RÜ / mlKuna viiruse RNA kogus on väljaspool kvantifitseerimisvahemiku ülemist piiri, on viiruse koormuse taset võimatu kindlaks teha. Vaja on korduvat testi vereproovi lahjendusega.

    Kindla genotüübi tuvastatud RNAC-hepatiidi viirus, mis kuulub kindlasse genotüüpi ja alatüüpi, leiti patsiendi biomaterjalist. Tulemust tähistatakse numbrite ja ladina tähtedega: 1a, 2b jne. Seal on 7 genotüüpi ja 67 alatüüpi. Seitsmest genotüübist leitakse esimesed 3 Venemaal.
    Tuvastatud C-hepatiidi viiruse RNAVenemaal leitud ebatüüpilise viiruse genotüübi RNA leiti patsiendi biomaterjalist, seetõttu on vaja täiendavaid uuringuid.
    Ei leitudInimene on terve või tema veres on viiruse RNA kontsentratsioon väga madal.

    Mõnikord on PCR-analüüs negatiivne, kuid ELISA-test näitab viiruse antikehade olemasolu. See tähendab, et ägeda C-hepatiidi põdeja on suutnud iseseisvalt taastuda. Umbes 20 nakkuse juhtumit, mille nakkuse keha on tugeva resistentsusega, lõpeb spontaanse raviga.

    Mõnes olukorras võivad ülitäpse PCR-analüüsi tulemused olla moonutatud:

    1. Temperatuuri režiimi ja muude laborisse vedamise tingimuste rikkumised.
    2. Vereproovide saastumine.
    3. Hepariini ja teiste antikoagulantide jälgede esinemine veres.
    4. Inhibiitorite olemasolu biomaterjalis (polümeraasi ahelreaktsioon aeglustub või peatub).

    PCR analüüsi eelised

    Esiteks on see varajase diagnoosimise meetod, mis võimaldab teil kindlaks teha viiruse geneetilise materjali. ELISA analüüs on võimeline määrama ainult aineid, mida organism vastusena infektsioonile toodab (immunoglobuliinid). Alates C-hepatiidi nakatumisest kuni immuunvastuse alguseni võib mööduda mitu nädalat või isegi kuud ning sel perioodil on ELISA ebaefektiivne. PCR-analüüs juba esimesel nakatumisnädalal annab vastuse.

    PCR-analüüsi teine ​​eelis on madal veatõenäosus. Uuringus määratakse kindlaks geneetiline materjal, mis on iseloomulik ainult ühele patogeeni tüübile, mis võimaldab välistada valetulemuse. ELISA analüüs näitab antikehade olemasolu, mis vabanevad erinevate viiruste vastu (ristantikehad).

    PCR puudused

    Ükskõik kui tõhus uuring oleks, on sellel oma puudused:

    • Hiina Rahvavabariigi uuringu käigus korratakse patogeenide (sealhulgas elutute) geneetilist materjali ja see põhjustab tulemuste moonutamist. PCR-analüüsi abil ravi efektiivsuse hindamiseks viiakse teine ​​uuring läbi vähemalt kaks kuud pärast eelmist. Patsiendi keha tuleb puhastada surnud viirustest.
    • Tesüsteemid määravad selle viiruse genoomi osa, mis teoreetiliselt võib kuuluda teistesse viirustesse või mikroorganismidesse, seetõttu on tõenäoline, et tulemus on valepositiivne.
    • Viiruste kiire mutatsioon ületab mõnikord testimissüsteemide võime patogeeni genoomi kindlaks teha, seetõttu on olemas valenegatiivse vastuse võimalus.

    Laborikatsesüsteemide tootjad kontrollivad neid regulaarselt, saades teada, kuidas süsteemid reageerivad ristreaktsioonidele või viiruse mis tahes genotüübile..

    C-hepatiidi PCR-analüüsi hind

    Valitsusasutustes saab analüüse teha tasuta, vajalik on ainult hepatoloogi või nakkushaiguste spetsialisti saatekiri.

    Tasulised uuringud on saadaval kõigis Vene Föderatsiooni suuremates linnades. Hinda mõjutavad uuringute tüüp, kasutatud seadmed, analüüsimiseks vajalik aeg.

    Moskvas ja Peterburis maksab C-hepatiidi kvaliteetne PCR-analüüs 600–900 rubla, piirkonnas - 300–800 rubla.

    C-hepatiidi kvantitatiivne PCR-analüüs maksab 17 000 - 22 000 rubla, B-hepatiidi korral - 1200 kuni 10 000 rubla.

    C-hepatiidi PCR-analüüsi usaldusväärsete tulemuste saamiseks peaksite võtma ühendust ainult mainekate laboritega. Sel juhul vajub teadusuuringute maksumuse küsimus tagaplaanile.